I principali centri abitati sono, Porto Santo Stefano, sede comunale, all'estremità nord-occidentale e Porto Ercole sulla sponda orientale del territorio. Presso la Fortezza Spagnola di Porto Santo Stefano sono ospitate le mostre permanenti dei Maestri d'Ascia, dedicata agli artigiani costruttori di navi e imbarcazioni da pesca, e delle Memorie Sommerse, impostata sui reperti ritrovati nelle acque intorno al Monte Argentario. Sul lungomare di Porto Santo Stefano e stato allestito dall'Accademia Mare Ambiente il Centro Didattico di Biologia Marina con annesso l'Acquario mediterraneo della Costa d'Argento.
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